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Modulo di biologia cellulare - sdm

Docente
Dott. Silvia De Marchis
Corso di studio
[f008-c202] laurea spec. in scienze biomolecolari - a torino
Anno
1° anno
Tipologia
Di base
Crediti/Valenza
1,5
SSD attività didattica
BIO/06 - anatomia comparata e citologia
Tipologia unità didattica
modulo
Corso integrato
Laboratorio di Biochimica e Biologia Cellulare (non attivato nell'a.a. 2009/2010) (S8094)
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Sommario del corso

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Obiettivi formativi

Il modulo si propone di introdurre gli studenti allo studio di problematiche di base di biologia cellulare nell’ambito della neurobiologia attraverso l’utilizzo di modelli in vitro. Saranno forniti elementi teorici e pratici per la caratterizzazione e l’uso sperimentale di linee cellulari e di colture primarie cellulari ed organotipiche.
Il modulo sarà svolto con la collaborazione del Dott. Andrea Messina
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Risultati dell'apprendimento attesi

Alla fine del corso gli studenti dovranno aver acquisito un’esperienza teorico-pratica in alcuni metodi di base utilizzati nella ricerca. Avranno acquisito maggior competenze nel campo dell’utilizzo di colture cellulari. Gli studenti dovranno aver maturato un’esperienza pratica di progettazione e realizzazione di un protocollo sperimentale.
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Programma

Il corso è organizzato in 2 ore di lezione teorica introduttiva e 20 ore/studente di esperienza di laboratorio. Gli studenti frequenteranno il laboratorio suddivisi in tre turni (ciascuno composto al massimo da 9 studenti). All'interno di ciascun turno i 9 studenti saranno suddivisi in tre gruppi di lavoro.

La frequenza del laboratorio sarà così organizzata:

TURNO1-laboratorio dal 12 al 16 gennaio

TURNO2-laboratorio dal 19 al 23 gennaio

TURNO3-laboratorio dal26 al 30 gennaio

PROGRAMMA

LUN

MARMERCGIOVVEN
14-18Passaggio cellule da 2 Petri 10cm subconfluenti.  -polilisinare vetrini -Staccare le cellule  -Conta -Semina su 2 PETRI da 10cm 2.500.000 cells/petri10 cm in 10% siero -Allestimento 2 VETRINI per IFL (12.500cells/petri 3.5 1 in SF medium 1 in 10% siero) Mattino Trasfezione -valutare confluenza cellule-staccare le cellule -piastrare su 4 piastre da 6 in OPTIMEM(2 Acreb ires GFP, 2 GFP) + una di linea 10cm-preparare mix trasfezione -trasfettare Reazione IFL Fissare i vetrini- reazione parte I10-11Cambio terreno (10%siero) con lavaggio in PBS  Osservazione cellule mantenimento linea14-19Boyden su cellule trasfettate(si uniscono le cellule dei tre gruppi- Ciascun gruppo prepara un terreno: BDNF, HGF o 10% siero) Fissare le petri trasfettate – colorazione DAPI A turno i tre gruppi:1)Analisi vetrini IFL Neurolucida con acquisizione immagini 2)Conta efficacia trasfezione al microscopio rovesciato stanza colture Sviluppo Boyden (dopo 3 ore)Tagliare le membrane a metà14-18Conta Boyden al microscopio   Elaborazione dati
Pomeriggio Sviluppo reazione IFL Cambio terreno trasfettate (tra 4-6 ore da inizio) 

 

 

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Testi consigliati e bibliografia

R.Ian Freshney, Culture of Animal Cells, 3rd edition
G.Banker & K.Goslin, Culturing Nerve Cells, 2nd edition
Fundamental Techniques in Cell Culture. A laboratory handbook. ECACC_Sigma, 2001
Jun-Lin Guan, Cell Migration, Developmental methods and protocols, 2005 Humana press
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Note

Tutti gli studenti sono convocati Giovedì 8 Gennaio 2008 ore 14 c/o AULA C per la lezione di introduzione teorica
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Ultimo aggiornamento: 15/01/2009 13:34
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